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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗？
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chemifunan

木虫 (正式写手)

海王小木虫
nicole1124(金币+4):谢谢哦~ 2010-06-02 08:42:08
SDS-PAGE根据不同类型的蛋白情况不同 有的可以见到变性不完全的高级结构 有的见不到 综合来说可以见到 你的情况是可能的 二聚或多聚一般指各自折叠好的亚基通过分子间作用自组装形成的蛋白高级结构 因此蛋白结合的主要方式是二硫键这句话欠妥 是不是二硫键也不是问题的关键 我忘了定义怎么定义的了 应该是一二级结构水平

单从你的描述还不能完全确证是不是 因为杂蛋白可能有重叠 你跑过凝胶柱没有？多大出来的？自己的蛋白是否以二聚体存在自己是知道的 确定是二聚体 WB出信号了大小也对了那就是了 只是PAGE胶上有没有可能 那有可能
有二聚影响你后面下结论吗？我的意见是不必管它
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Bemühen Sie !
11楼2010-05-08 15:47:38
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neon_alone

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-12-23 23:42:04
有时候如果变性不充分，比如煮的时间或者温度不够，或者是loading buffer保存时间太长，有可能已然失效了，这样就会出现二聚体的~如果正好是你蛋白二倍的话基本是二聚体，但如果只大一些，有可能是磷酸化或者糖基化的一些修饰
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12楼2011-12-23 19:34:54
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blackrose8089
引用回帖:
12楼: Originally posted by neon_alone at 2011-12-23 19:34:54:
有时候如果变性不充分，比如煮的时间或者温度不够，或者是loading buffer保存时间太长，有可能已然失效了，这样就会出现二聚体的~如果正好是你蛋白二倍的话基本是二聚体，但如果只大一些，有可能是磷酸化或者糖基 ...

13楼2011-12-23 21:54:10
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落满夏天

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
二聚体完全可以通过电泳分析。还原非还原就可以确认。
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星星之火，可以燎原
14楼2013-08-21 17:30:35
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
原因大家回答已经很充分了，我就不回答了。我回答二聚体的检测方法：直接用质谱测定即可，检测出是否有二聚体存在，不用过多的提纯目的蛋白质，但是要知道其相对分子量 的大致数据。
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15楼2013-08-22 00:02:01
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未雨绸缪

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
16楼2013-08-24 21:28:46
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