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nicole1124

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗? 已有10人参与

跑了SDS胶后做的WB,共转了另一种蛋白后,条带上方出现了很明显的一条带,分子量正好是我的目的蛋白的二倍,可是理论上蛋白二聚体之间的结合方式不是二硫键吗,在跑PAGE时就应该被loading buffer 中的二巯基乙醇打断了啊,还是蛋白结合还有其它方式?蛋白组学的高手指点一下吧~~
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chemifunan

木虫 (正式写手)

海王小木虫

nicole1124(金币+4):谢谢哦~ 2010-06-02 08:42:08
SDS-PAGE根据不同类型的蛋白情况不同 有的可以见到变性不完全的高级结构 有的见不到 综合来说可以见到 你的情况是可能的 二聚或多聚一般指各自折叠好的亚基通过分子间作用自组装形成的蛋白高级结构 因此蛋白结合的主要方式是二硫键这句话欠妥 是不是二硫键也不是问题的关键 我忘了定义怎么定义的了 应该是一二级结构水平

单从你的描述还不能完全确证是不是 因为杂蛋白可能有重叠 你跑过凝胶柱没有?多大出来的?自己的蛋白是否以二聚体存在自己是知道的 确定是二聚体 WB出信号了大小也对了那就是了 只是PAGE胶上有没有可能 那有可能
有二聚影响你后面下结论吗?我的意见是不必管它
Bemühen Sie !
11楼2010-05-08 15:47:38
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:21
SDS-PAGE,standard protocol 一般见不到蛋白二聚体
2楼2010-05-02 22:42:21
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临风7071

木虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
能看到二聚体的,我曾经也碰到过,老师就说蛋白煮过后有可能会形成二聚体的,
3楼2010-05-02 22:49:52
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
话说蛋白二聚体不是按二硫键结合吧...二聚体属于四级结构了吧
我觉得会不会是楼主的蛋白isoform或者是剪切前体啊
4楼2010-05-02 23:00:12
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