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nicole1124

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗? 已有10人参与

跑了SDS胶后做的WB,共转了另一种蛋白后,条带上方出现了很明显的一条带,分子量正好是我的目的蛋白的二倍,可是理论上蛋白二聚体之间的结合方式不是二硫键吗,在跑PAGE时就应该被loading buffer 中的二巯基乙醇打断了啊,还是蛋白结合还有其它方式?蛋白组学的高手指点一下吧~~
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引用回帖:
12楼: Originally posted by neon_alone at 2011-12-23 19:34:54:
有时候如果变性不充分,比如煮的时间或者温度不够,或者是loading buffer保存时间太长,有可能已然失效了,这样就会出现二聚体的~如果正好是你蛋白二倍的话基本是二聚体,但如果只大一些,有可能是磷酸化或者糖基 ...

13楼2011-12-23 21:54:10
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:21
SDS-PAGE,standard protocol 一般见不到蛋白二聚体
2楼2010-05-02 22:42:21
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临风7071

木虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
能看到二聚体的,我曾经也碰到过,老师就说蛋白煮过后有可能会形成二聚体的,
3楼2010-05-02 22:49:52
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
话说蛋白二聚体不是按二硫键结合吧...二聚体属于四级结构了吧
我觉得会不会是楼主的蛋白isoform或者是剪切前体啊
4楼2010-05-02 23:00:12
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