应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 求助！单体蛋白在SDS-PAGE中出现了倍数关系的大条带！
51/1返回列表
查看: 1459  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

老狗1989

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！单体蛋白在SDS-PAGE中出现了倍数关系的大条带！

我的单体蛋白约15.6KD，在与某二肽混合贮存一段时间之后，加Loading buffer、95℃ 5min、高速离心、跑SDS-PAGE,考染脱色后在胶上看到了倍数关系的大条带，求各位帮忙解释。。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2013-03-31 11:28:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

auroraA

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的实验组和对照组有什么区别?如果是从细胞来的蛋白,可能是ubiquitination或者glycosylation.也可能是oligomerization,别太迷信SDS的能力. 你的sample buffer理有没有beta-merceptomethanol or DTT?如果没有或不足,也可能是disulphide bond
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-03 13:20:35
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 应助指数-1, 这段文字非常眼熟，以后请少复制粘帖，最好能有针对性的回答 2013-04-01 08:41:11
一 ：试着看下当时配置浓缩胶和分离胶的参数比例，是不是和你要测的蛋白质样品的分子量大小合适，这个可以参考相关文献或者有蛋白质样品对照库里面有配置浓度的指导。
二：就是胶带里位置梯度的PH浓度是否合理，分离胶的浓度一般情况下比较低，所以合适的PH也是做出perfect胶的利器。
三：就是所选用的染料或自发荧光的问题，选择性的使用考马斯亮蓝R-250通常，银盐染料，violet17或者溴化乙锭等染色，这个你可以看一下之前的实验是怎么进行的。
四：可能是你的胶带分离后暗室X放射自显的时候没有曝光好。
五：当时梳子的之后注射混进去微小的气泡，导致胶带不均匀。
最差的就是和之前有人提供的一样，一些试剂可能是假冒伪劣产品，也不排除这种情况。
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-31 22:44:30
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

多肽合成服务

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
3楼2013-04-01 09:34:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

遥控器68

金虫 (小有名气)
路过，求图看真相
回复此楼
4楼2013-04-01 10:21:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭