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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE测定蛋白分子量
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muziyu1024

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE测定蛋白分子量 已有5人参与

ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定蛋白质分子量，我用买的标准分子量测定sigma的鼠尾胶原蛋白的分子量，测定结果比说明书给的要大20KDa。请问有遇到类似问题的吗？可能是什么因素造成的？
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1楼 2010-12-02 00:03:35
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-02 08:07:44
SDS-PAGE里面的marker买回来也是要煮沸变性的，不知道你是否煮了，如果不变性的话跑起来会比较慢。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-02 02:58:18
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muziyu1024

金虫 (小有名气)
最爱花诗雨:可以使用“引用回复该贴”与虫友交流 2011-01-07 21:14:43
我买的是预染得蛋白，说明书说不需要煮沸，非常谢谢你
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3楼2010-12-03 00:03:12
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laoshu16

银虫 (小有名气)
marker 不准
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在幻变的生命中，岁月原是那最大的小偷。。。
4楼2011-01-07 16:49:43
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+2): 2011-01-07 21:15:48
引用回帖:
Originally posted by laoshu16 at 2011-01-07 16:49:43:
marker 不准

有这可能，但是这种几率特别小吧

之前我们实验室还在真遇到过买的蛋白Marker不准的情况

后来就一直买BIO-RAD的蛋白Marker了
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
5楼2011-01-07 21:03:36
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xxzcf

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): duide 2011-07-09 08:02:40
跑胶的时候的marker大多是球状蛋白质，跑得比线性蛋白快
文献丛1970年代就描述过，胶原蛋白跑胶，显示分子量比理论值大20-30kDa
胶原蛋白的氨基酸序列，也影响其sds中的电荷性，最终导致移动缓慢。

通常情况下，至少国外厂商的蛋白质markerhui 特别注明，不需加热直接使用。
通常加热时为了降解二硫键，marker中有抗氧化剂和稳定剂。
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6楼2011-07-08 22:51:18
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muziyu1024

金虫 (小有名气)
非常谢谢你，能告诉我一下是哪篇文献说胶原蛋白SDS-PAGE测定的分子量大吗？
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7楼2011-07-11 18:56:46
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