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muziyu1024

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE测定蛋白分子量已有5人参与

ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定蛋白质分子量，我用买的标准分子量测定sigma的鼠尾胶原蛋白的分子量，测定结果比说明书给的要大20KDa。请问有遇到类似问题的吗？可能是什么因素造成的？

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1楼2010-12-02 00:03:35

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xxzcf

铁杆木虫 (小有名气)

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): duide 2011-07-09 08:02:40

跑胶的时候的marker大多是球状蛋白质，跑得比线性蛋白快
文献丛1970年代就描述过，胶原蛋白跑胶，显示分子量比理论值大20-30kDa
胶原蛋白的氨基酸序列，也影响其sds中的电荷性，最终导致移动缓慢。

通常情况下，至少国外厂商的蛋白质markerhui 特别注明，不需加热直接使用。
通常加热时为了降解二硫键，marker中有抗氧化剂和稳定剂。