| 查看: 3813 | 回复: 11 | ||
海之韵-哈哈银虫 (小有名气)
|
[求助]
诱导蛋白表达 SDS-PAGE没有目的条带 已有1人参与
|
|
| 我最近在做基因的原核表达，做的是一种内切木聚糖酶，表达载体为pET28a，宿主细胞为BL21。将菌液摇至OD=0.5-0.7时加0.2mM IPTG诱导 20度 180rpm培养12h、16h、20h、24h。菌体超声波破碎，破碎后离心有很多白色沉淀，上清可以测出酶活。将上清液和沉淀进行SDS-PAGE电泳，上清中没有目的条带，沉淀中有目的条带。沉淀中有目的条带应该是包涵体，但是为什么上清中可以测到酶活却没有目的条带啊？急求各路高手指点！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有14人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有5人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有17人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有15人回复
-
2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战
已经有5人回复
-
跳槽后在研项目怎么办？
已经有10人回复
-
什么时候开奖？
已经有10人回复
-
今天放榜吗？
已经有16人回复
-
93BebMhtakh前后11位开头都是大写
已经有8人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有26人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 目的蛋白表达量低
已经有4人回复
- SDS-PAGE中蛋白条带位置不一致
已经有13人回复
- 蛋白异源表达，条带大小不对啊
已经有12人回复
- 大量培养 诱导 蛋白没有差异表达
已经有11人回复
- 我的蛋白序列鉴定都是正确的，可是为什么就是不表达，是为什么呢？附SDS-PAGE图
已经有51人回复
- 请教关于酵母诱导蛋白表达的问题alpha-factor是什么东西？
已经有7人回复
- IPTG诱导表达蛋白
已经有14人回复
- 原核表达载体蛋白诱导
已经有18人回复
- 原核表达和SDS-PAGE
已经有9人回复
- 求指点用IPTG诱连接在pET28a上的蛋白表达
已经有13人回复
- 请问pET30b这个载体在IPTG诱导后有没有可能表达除了目的蛋白以外的其他蛋白？
已经有16人回复
- 无IPTG诱导蛋白依然很好表达
已经有13人回复
- IPTG诱导后，考染后什么蛋白条带都没有
已经有12人回复
- SDS-PAGE和PAGE的区别（SDS-PAGE测出来的一定就是蛋白质相对分子质量？）
已经有17人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- 膜蛋白表达问题
已经有15人回复
- 如何动态观察细菌体内某蛋白的分布，及表达量
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导时间
已经有9人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】诱导pkd46质粒表达不出目的蛋白
已经有12人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导问题咨询
已经有13人回复
- 蛋白诱导
已经有10人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MicEPI: 1
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
7楼2013-12-03 15:42:17
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MicEPI: 1
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-12-03 05:17:40
kx444555
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 56 (初中生)
- 贵宾: 1.326
- 金币: 10554.2
- 散金: 288
- 红花: 12
- 帖子: 820
- 在线: 238小时
- 虫号: 999718
- 注册: 2010-04-18
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
3楼2013-12-03 08:23:02
海之韵-哈哈
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 234.6
- 帖子: 185
- 在线: 61.4小时
- 虫号: 2028353
- 注册: 2012-09-25
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-12-03 08:57:47
海之韵-哈哈
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 234.6
- 帖子: 185
- 在线: 61.4小时
- 虫号: 2028353
- 注册: 2012-09-25
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2013-12-03 09:01:16
guhousheng
木虫 (小有名气)
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 2846.5
- 散金: 52
- 帖子: 130
- 在线: 27.9小时
- 虫号: 1851507
- 注册: 2012-06-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2013-12-03 09:50:18
稻草人的学习
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 401.9
- 散金: 254
- 帖子: 206
- 在线: 58.6小时
- 虫号: 2423775
- 注册: 2013-04-18
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
8楼2013-12-16 21:37:41
海之韵-哈哈
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 234.6
- 帖子: 185
- 在线: 61.4小时
- 虫号: 2028353
- 注册: 2012-09-25
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2013-12-18 21:36:52
稻草人的学习
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 401.9
- 散金: 254
- 帖子: 206
- 在线: 58.6小时
- 虫号: 2423775
- 注册: 2013-04-18
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
10楼2013-12-19 10:40:10
40