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海之韵-哈哈银虫 (小有名气)
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诱导蛋白表达 SDS-PAGE没有目的条带 已有1人参与
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| 我最近在做基因的原核表达，做的是一种内切木聚糖酶，表达载体为pET28a，宿主细胞为BL21。将菌液摇至OD=0.5-0.7时加0.2mM IPTG诱导 20度 180rpm培养12h、16h、20h、24h。菌体超声波破碎，破碎后离心有很多白色沉淀，上清可以测出酶活。将上清液和沉淀进行SDS-PAGE电泳，上清中没有目的条带，沉淀中有目的条带。沉淀中有目的条带应该是包涵体，但是为什么上清中可以测到酶活却没有目的条带啊？急求各路高手指点！！！ |
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kx444555
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3楼2013-12-03 08:23:02
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海之韵-哈哈
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