应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE中蛋白条带位置不一致
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3726  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE中蛋白条带位置不一致

前后几次SDS-PAGE中，同样的样品跑出来的蛋白条带位置与Marker对比不一样，第一次跑的时候，我要的目的蛋白条带与Marker 的25 kd 的带几乎一样大，但是后来跑的时候那条带又比Marker 25 KD 的带大了，在它上边，哪位大侠知道这是什么原因呀？！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 蛋白表达纯化与检测

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-23 09:35:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by avex514 at 2013-10-24 09:52:27
如果loading buffer里面加了巯基乙醇的话，就不会存在二硫键形成的问题吧...

这同样有一个具体β-巯基乙醇的量的问题，不是非黑即白的问题，而且β-巯基乙醇不能阻止酰胺键的形成。
赞一下 回复此楼
10楼2013-10-24 23:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:31:07
如果没有改变电泳胶和缓冲溶液的浓度和类型，那么最有可能是你的样品蛋白质有凝聚或者共价修饰出现或较大的构象改变，Marker存在降解或较大的构象改变。检测构象改变的方法可以用红外、紫外对比不同批次的样品和Marker，检测是否有降解降解或者共价修饰可用质谱检测不同批次的样品和Marker。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2013-10-23 10:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-10-23 10:40:00
如果没有改变电泳胶和缓冲溶液的浓度和类型，那么最有可能是你的样品蛋白质有凝聚或者共价修饰出现或较大的构象改变，Marker存在降解或较大的构象改变。检测构象改变的方法可以用红外、紫外对比不同批次的样品和Mar ...

额，这样啊，我同学的蛋白条带也是这样，难道我们的样品都有问题了？
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-23 12:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:31:23
不可能是蛋白质凝聚产生的，因为你做SDS-PAGE时，你已经将你的目的蛋白变性，因此不存在分子间的二硫键，也更无分子间构象改变一说，如果实在你要确定你的蛋白的分子量，那么你可以做迁移率实验，将你的蛋白Marker 做迁移率试验，得到标曲，然后再用你的目的蛋白做迁移率实验，再通过标曲找到对应的分子量
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-23 22:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +4 XX小邓 2026-03-29 4/200 2026-03-29 17:34 by 无际的草原
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +6 26要上岸 2026-03-28 6/300 2026-03-29 16:49 by 杨杨杨紫
[考研] 275求调剂 +13 Micky11223 2026-03-25 18/900 2026-03-29 16:23 by 学员8dgXkO
[考研] 考研调剂 +6 小蜡新笔 2026-03-29 6/300 2026-03-29 15:26 by 唐沐儿
[考研] 070300化学354求调剂 +6 101次希望 2026-03-28 6/300 2026-03-29 12:57 by 无际的草原
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 289求调剂 +13 新时代材料 2026-03-27 13/650 2026-03-29 01:16 by 544594351
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭