| 查看: 1108 | 回复: 3 | |||
lovehejuhua银虫 (小有名气)
|
[求助]
表达外源蛋白后测酶活相关问题
|
|
1，最近构建了一株菌成功表达了外源蛋白，接下来整细胞催化测酶活，初步测具有活性，能够催化底物生成产物，但是一直在纠结怎么计算酶活单位，我是用 整个细胞进行催化的，细胞是离心后没0.1g用1Ml缓冲液重悬起来，再投入一定浓度的底物进行催化，请教各位该怎么计算酶活？, 2，另外，还有一个问题，我把重悬的细胞一直都是在4度保存着，这样的细胞还具有催化能力吗？每次摸索催化条件难道我都要重新培养收集菌体了以后才能进行反应么？这样不是很麻烦，有什么方法可以让细胞保持一定的活力？以便下次反应的时候可以直接使用上次收集的菌体 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有114人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何使大肠杆菌表达的时候不产生包涵体
已经有19人回复
- 为什么要用合成的基因进行蛋白外源表达呢？
已经有13人回复
- 包涵体有活性吗？
已经有10人回复
- 有人知道大肠杆菌中的外源蛋白最大表达量吗
已经有6人回复
- 求助！关于GST融合蛋白纯化！楼主愁得一夜没有睡好！
已经有20人回复
- pET28a载体和目的基因
已经有9人回复
- 大肠杆菌表达42kd的蛋白，蛋白电泳显示只有35kd，测酶活还比较高，这是怎么回事儿呢？
已经有9人回复
- 测定胃蛋白酶活力时候的问题
已经有10人回复
- 毕赤酵母表达问题求教
已经有19人回复
- 同时表达两种蛋白表达问题
已经有3人回复
- 大肠杆菌表达蛋白提取总不成功，求助高手指教！
已经有5人回复
- β-糖苷酶表达可溶性蛋白很多，怎么就是没有活性
已经有24人回复
- 蛋白酶菌株酶活问题
已经有10人回复
- 毕赤酵母表达出蛋白但没有活性
已经有18人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- 大家见到过毕赤酵母表达出的外源蛋白分子量比实际分子量小吗，而且还有活性？
已经有20人回复
- 酶活与酶蛋白含量关系
已经有9人回复
- DH5α能否表达外源蛋白
已经有15人回复
- 大肠杆菌中表达外源蛋白补加葡萄糖
已经有5人回复
- 紫外分光光度法测蛋白酶活
已经有19人回复
- 【求助/交流】用大肠杆菌DH10B做外源表达
已经有3人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】枯草中表达外源基因，有蛋白，但是没有酶活，是什么原因？
已经有4人回复
- 以NADH为底物的酶的酶活测定
已经有10人回复
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
2楼2013-10-11 10:45:07
pennchem
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +21 - MolEPI: 1
- 应助: 297 (大学生)
- 金币: 10455.5
- 散金: 65
- 红花: 28
- 帖子: 596
- 在线: 1100.7小时
- 虫号: 2139205
- 注册: 2012-11-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学
3楼2013-10-11 12:20:07
lovehejuhua
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 137.5
- 散金: 135
- 红花: 1
- 帖子: 148
- 在线: 68.2小时
- 虫号: 1466401
- 注册: 2011-10-29
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传学
4楼2013-10-14 15:40:01
10