| 查看: 1201 | 回复: 4 | |||
yanhong2029
|
[交流]
【求助/交流】枯草中表达外源基因，有蛋白，但是没有酶活，是什么原因？ 已有3人参与
|
|
来源于大肠杆菌一种变形菌（革兰氏阳性细菌）的外源目的基因，将其克隆至大肠杆菌中表达，能够表达出活性。 然后将其克隆至枯草芽孢杆菌中表达，采用的是枯草编码30S核糖蛋白rpsD基因的启动子，该启动子是一组成型强启动子。该表达出来的蛋白酶，在作用于底物时需要还原型辅酶I：NADH。 SDS-PAGE显示有蛋白，但是测定酶活性时一直没有结果？ 十分苦恼，未知是什么原因？ 是形成包涵体呢？ 还是该蛋白在该宿主中虽然表达，但是表达出来的就是没有活性的蛋白？ 还是辅酶的原因？ 需要如何确定？ 还请各位朋友能够帮忙解决！ 着急毕业呢！ 先谢谢各位了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有162人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 枯草芽孢杆菌聚谷氨酸降解酶基因的原核表达及酶性质分析
已经有5人回复
- [size=5]外源基因原核表达遭遇种种瓶颈，求各位高手近来解答[/size]
已经有13人回复
- 基因没有变化但是蛋白减少会是什么原因呢？
已经有4人回复
- β-糖苷酶表达可溶性蛋白很多，怎么就是没有活性
已经有24人回复
- 蛋白酶菌株酶活问题
已经有10人回复
- 毕赤酵母表达出蛋白但没有活性
已经有18人回复
- 蛋白酶基因表达，用的Bacillus subtilis系统，但总是表达不出，求高人指点……
已经有19人回复
- 大家见到过毕赤酵母表达出的外源蛋白分子量比实际分子量小吗，而且还有活性？
已经有20人回复
- 求助：关于基因表达中调控蛋白和转录调控蛋白的连接和表达
已经有5人回复
- 酶基因表达量高，酶活性就一定高吗？（请大家帮帮忙，谢谢）
已经有12人回复
- 【求助/交流】原核表达羊基因，cDNA长度约为3kb，基因为一种有活性的酶
已经有15人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌表达，有蛋白无酶活，如何解决
已经有5人回复
- 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】急！关于外源基因在丝状真菌中的融合表达
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈，液体诱导却无酶活
已经有5人回复
wish0310
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 34807.1
- 散金: 7
- 红花: 1
- 帖子: 2726
- 在线: 78.3小时
- 虫号: 700299
- 注册: 2009-02-12
- 专业: 环境微生物学
2楼2010-06-03 20:36:16
yanhong2029 
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2843.9
- 散金: 103
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 92.2小时
- 虫号: 715967
- 注册: 2009-03-06
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2010-06-03 21:41:20
85715623
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4952.7
- 红花: 2
- 帖子: 585
- 在线: 60.1小时
- 虫号: 669907
- 注册: 2008-12-07
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
4楼2010-06-03 22:04:35
yanhong2029
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2843.9
- 散金: 103
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 92.2小时
- 虫号: 715967
- 注册: 2009-03-06
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
5楼2010-06-03 22:41:17
