24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 525  |  回复: 5

xieya1234_0

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量求助

我现在要做植物病毒的定量PCR,可是我的病毒目的片段是外源,内参基因是植物自身的,因为我的病毒是RNA的,所以不知道反转录是应该怎样进行,是都用随机引物或oligo(dt),还是两个基因分别反转录啊,谢谢了.我做的是相对定量

[ Last edited by xieya1234_0 on 2013-10-10 at 13:32 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个基因分别反转录
用随机引物
2楼2013-10-10 14:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhibao214

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-11 09:37:41
两种引物都加上反转录就行,或者你用特异性引物分别反转录,不过这样比较麻烦。如果你的病毒RNA后面没有poly A,只用oligo(dt)是不行的,必须用随机引物
3楼2013-10-11 09:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xieya1234_0

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhibao214 at 2013-10-11 09:15:06
两种引物都加上反转录就行,或者你用特异性引物分别反转录,不过这样比较麻烦。如果你的病毒RNA后面没有poly A,只用oligo(dt)是不行的,必须用随机引物

如果特异引物的话,不是反转录出来就是片段了吗,再做荧光的话就是片段扩片段了
4楼2013-10-12 10:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
5楼2013-10-12 10:41:04
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

zhibao214

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by xieya1234_0 at 2013-10-12 10:29:54
如果特异引物的话,不是反转录出来就是片段了吗,再做荧光的话就是片段扩片段了...

对啊,本来反转录后就是cDNA片段啊,你用特异性引物反转录的时候最好不要和qPCR的引物一样,最好反转录的片段长一些。不过还是建议你加上随机引物和oligo (dT)反转录,这样比较简单
6楼2013-10-12 17:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xieya1234_0 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕274求调剂,不挑专业学校 +6 泛泛2333 2026-04-05 7/350 2026-04-05 23:20 by chyhaha
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:29 by 啵啵啵0119
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 282求调剂 +7 aaa车辆 2026-04-02 11/550 2026-04-05 17:24 by yulian1987
[考研] 一志愿华中农业大学0710(A)初试329分 求调剂 +4 一名26考研生 2026-04-04 4/200 2026-04-05 10:01 by barlinike
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 368求调剂 +5 今华习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 18:47 by imissbao
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 321求调剂 +17 y-yh 2026-04-01 20/1000 2026-04-03 12:57 by y-yh
[考研] 319求调剂 +18 太容易1018 2026-04-01 18/900 2026-04-03 11:18 by linyelide
[考研] 一志愿山东大学,085600,344 +7 魏子per 2026-04-02 8/400 2026-04-02 21:12 by 百灵童888
[考研] 311求调剂 +14 蓝月亮亮 2026-03-30 14/700 2026-04-02 12:18 by 1753564080
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +9 双马尾痞老板2 2026-04-01 9/450 2026-04-02 12:14 by oooqiao
[考研] 322求调剂 +5 熹僖XX 2026-03-31 6/300 2026-04-02 10:08 by 求调剂zz
[考研] 085410 一志愿211 22408分数359求调剂 +3 123456789qw 2026-03-31 4/200 2026-04-02 00:06 by 义文wang
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
信息提示
请填处理意见