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xieya1234_0

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量求助

我现在要做植物病毒的定量PCR,可是我的病毒目的片段是外源,内参基因是植物自身的,因为我的病毒是RNA的,所以不知道反转录是应该怎样进行,是都用随机引物或oligo(dt),还是两个基因分别反转录啊,谢谢了.我做的是相对定量

[ Last edited by xieya1234_0 on 2013-10-10 at 13:32 ]
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xieya1234_0

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhibao214 at 2013-10-11 09:15:06
两种引物都加上反转录就行,或者你用特异性引物分别反转录,不过这样比较麻烦。如果你的病毒RNA后面没有poly A,只用oligo(dt)是不行的,必须用随机引物

如果特异引物的话,不是反转录出来就是片段了吗,再做荧光的话就是片段扩片段了
4楼2013-10-12 10:29:54
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个基因分别反转录
用随机引物
2楼2013-10-10 14:10:16
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zhibao214

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-11 09:37:41
两种引物都加上反转录就行,或者你用特异性引物分别反转录,不过这样比较麻烦。如果你的病毒RNA后面没有poly A,只用oligo(dt)是不行的,必须用随机引物
3楼2013-10-11 09:15:06
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匿名

用户注销 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
5楼2013-10-12 10:41:04
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