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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR出现杂带
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zhghlj

新虫 (小有名气)

[求助] PCR出现杂带

我最近正在P一个基因，电泳点样量为5ul 时 可以看到单一条带，但是我有一天换用大梳子，点了8ul 的样，竟然发现在这条很亮的条带前后都有杂带。。。这样的现象算是正常的吗？
谢谢！
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1楼 2013-09-12 10:59:54
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-12 18:10:44
5ul和8ul应该不会有这么大差别啊，不过上样量多了杂带更清晰也属正常。
并且每次PCR条件不一样，这也不一定是上样量的问题。
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一直向前！
2楼2013-09-12 12:50:11
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zhghlj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2013-09-12 12:50:11
5ul和8ul应该不会有这么大差别啊，不过上样量多了杂带更清晰也属正常。
并且每次PCR条件不一样，这也不一定是上样量的问题。

我每次设置的条件是一样的 所以我就在怀疑这3ul 的上样量真的会有这么大的影响吗？
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3楼2013-09-12 13:14:17
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhghlj at 2013-09-12 13:14:17
我每次设置的条件是一样的 所以我就在怀疑这3ul 的上样量真的会有这么大的影响吗？...

会不会是后来上样中间有DNA降解现象？
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一直向前！
4楼2013-09-13 14:16:20
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
宽孔的电泳条带更细，分辨率略有提高。上样量增加能使条带亮度增加，原来该条带可能量少亮度低所以没看到。
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5楼2013-09-13 15:07:31
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RUI1990

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是PCR操作有区别，单纯的点样量增多应该不会有太大的差别~~~
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做自己
6楼2013-09-13 17:01:31
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zhghlj

新虫 (小有名气)
谢谢大家，我打算再做一次重复看看！
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7楼2013-09-15 12:42:47
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清雅风

木虫 (著名写手)
换换缓冲液，缓冲液污染了也会有条带的
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朝着自己的理想奔跑，就是幸福！
8楼2013-09-15 15:19:00
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