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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献

[交流] 纯化后跑胶有杂带 已有3人参与

同学扩增的dna一条杂带都没有,纯化后在我制的1%琼脂糖胶上跑胶出现杂带,害得他又重新pcr,回收,纯化一次,然后他用2%的胶就没有任何杂带,我的胶我也跑了,除了提取质粒的检测,基本都只有一条带!很费解!

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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献

沮丧啊!!有没有人知道原因的!点样的人没有交叉污染,求高手指导!!

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Dripping Concentrated!!energetic and active!
2楼2012-10-17 15:23:43
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lillian菲

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,如果是质粒提取有杂带很正常,质粒有不同的形态
3楼2012-10-17 15:37:37
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zhangby2002

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的有点乱,你可以把你的图片上传一下进行分析吗?给你建议:1PCR产物是否有问题;2:胶回收试剂盒是否有问题(没问题要严格按照里面的步骤操作,国产的一般都达到80%以上吧,进口更好)3:看你的片段多大?琼脂糖胶一般1.5%-2%吧。4:切胶操作是否规范。等等吧,欢迎交流。
业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。
4楼2012-10-17 15:42:37
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太极拳

木虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒确实会有几条带的!
5楼2012-10-17 16:07:42
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献

引用回帖:
3楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-10-17 15:37:37
你好,如果是质粒提取有杂带很正常,质粒有不同的形态

情况是这样的:昨晚同学回收dna纯化后要跑胶检测,只有2个样,正好我有5个回收检测的样,然后4个加内参验证基因组的片段都为500bp的样,还有2个质粒提取检测的样,结果,我的除了质粒外,回收检测的跟内参的都只有1条带,但是同学的纯化后却有2条带,他2个样都有2条带!所以今上午他又重新pcr,回收,纯化,检测(把昨晚的一起检测),结果只有1条带,他过来跟我说浪费他一上午,这个结果搞得我莫名其妙

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6楼2012-10-17 17:28:41
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