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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落pcr 16s扩增
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)

[求助] 菌落pcr 16s扩增

请问下大家，小弟我做16s扩增，菌落pcr。在扩增后跑电泳，发现有时条带有拖尾现象，但是阴性对照没有条带。送去测序后，发现有时有套峰，叠峰现象。我的16s加样等操作均在超净台中进行。请大家帮忙下，到底是哪里出问题啊。
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1楼 2013-09-09 11:30:22
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yimingwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-09 20:16:14
是否因为菌落不纯？
另一个原因可能是酶和buffer的问题。调整Mg含量，或者换个酶和buffer看看有没有改进。
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Let'sdoit.
2楼2013-09-09 16:20:53
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yimingwang at 2013-09-09 16:20:53
是否因为菌落不纯？
另一个原因可能是酶和buffer的问题。调整Mg含量，或者换个酶和buffer看看有没有改进。

可能是菌落问题吧，但是菌落已经都是单菌落了。如果是酶问题，那阴性对照应该有条带，但是我的阴性对照没有条带啊。
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3楼2013-09-10 15:51:39
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