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忘忧草_木虫 (正式写手)
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M13通用引物为什么有这么多种？
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最近发现M13通用引物为什么有这么多种啊？在生工网站上看到有： M13/pUC Sequencing Primer(-20) d(GTA AAA CGA CGG CCA GT) M13/pUC Sequencing Primer(-40) d(GTT TTC CCA GTC ACG AC) M13/pUC Sequencing Primer(-47) d(CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC) M13/pUC Reverse Sequencing Primer d(AAC AGC TAT GAC CAT G) M13/pUC Reverse Sequencing Primer (-48) d(AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGA) 他们之间有社么区别吗？ 怎么使用啊？ |
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 实验中的策略 |
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| 引物的位置和长度稍有不同。引物长短不同影响PCR时的退火温度。位置主要是因为测序时靠近引物的序列信号差，如果你克隆插入时所用的酶切位点比较靠近多克隆位点的末端，需要用离得稍微远一些的引物才能完全测出插入片段的序列。如果你只是用于一般的PCR检测，只要选取两个退火温度匹配是上下游引物就行了。 |
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忘忧草_2楼2013-08-28 22:24:14
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