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蛋白纯化阶段出现问题
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用his-tag标签法纯化蛋白，竟然没有目的蛋白，给沉淀、上清、流出液跑电泳也没有出现目标条带！基因根本没有表达…… 表达载体测（含抗氨苄基因）序结果是没问题的。以M15/rep4做感受态菌的转化，转化后，有菌落在双抗（氨苄和卡那）培养基上长出。我用这种菌落去纯化蛋白…… 为什么没有表达啊  恳请各位前辈给一些建议，我下一步该怎么做啊！小弟真的是太郁闷了  |
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