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求助 关于RT PCR 内参问的问题
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我做2BS细胞的P16 mRNA 和 Bmi-1的表达情况 怎么选择内参基因 我在NCBI上查看β-actin这个内参 出来好多人类的，，到底该用哪个 看不懂啊 谁能告诉下 还有 谁能帮我验证下引物设计的合理不合理 能不能扩出来 赠送 伊苏7PC版激活码1个 本人玩通了。。。 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-08-22 00:03:47
mckeil: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯 按照你说的我已经把引物设计好了 不过blast 不会用呢 我慢慢学一下的 2013-08-23 08:28:08
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-08-22 00:03:47
mckeil: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯 按照你说的我已经把引物设计好了 不过blast 不会用呢 我慢慢学一下的 2013-08-23 08:28:08
| 选realtime PCR 内参基因的引物，如beta-actin,一般是取自文献里面的，基本上所有的文献都会给出所有REAL-TIME PCR基因的引物，你blast一下后可直接使用；关于你的特异基因的引物设计，一般先查下文献，或者有网站收集这些realtime 引物的（人和小鼠的），确定没有的再自己设计引物，最好100-200bp吧，跨外显子和内含子为上，条带单一，其他无所谓吧。做realtime PCR之前一般都要用一般的PCR摸索一下反应条件以及引物的特异性。 |
2楼2013-08-21 22:47:42