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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性有关问题
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hc42

木虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性有关问题

想要通过1%的琼脂糖凝胶电泳检测所提RNA的完整性：
1.采用普通电泳还是甲醛变性凝胶电泳呢，有人说普通电泳就可以检测了？
2.缓冲液用哪个好呢（TAE,TBE,MOPS）?
3.EB染色的话是加在缓冲液中，还是跑完后再进行染色好呢？
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1楼 2013-07-31 14:50:11
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没想象的那么严重，直接用平常的电泳就ok，Good luck！
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互助互励，共奋共进！！
4楼2013-08-01 03:42:30
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草蔻年华

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-08-01 12:09:51
1.用普通电泳跑过，180V电压十分钟即可观察结果。
2.用的是TAE
3.用的是Genefinder，直接加在缓冲液里的。
希望对你有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-07-31 17:33:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-08-01 12:09:57
如果只是检查完整性，用普通电泳就行了，不过非变性样品容易在电泳过程中降解，需要注意缓冲液新配置，电泳时间尽量不要长。变性电泳可以更准确的确定条带的分子量，对维持RNA本身在电泳过程中的完整性有帮助。
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3楼2013-08-01 00:45:18
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hc42

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草蔻年华 at 2013-07-31 17:33:09
1.用普通电泳跑过，180V电压十分钟即可观察结果。
2.用的是TAE
3.用的是Genefinder，直接加在缓冲液里的。
希望对你有帮助。

本人新手，第一次跑，顺便咨询下6x上样缓冲液的配方，要加EDTA吗？配的时候最后是用超纯水定容还是TAE定容呢？
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5楼2013-08-01 07:54:53
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