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hc42

木虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性有关问题

想要通过1%的琼脂糖凝胶电泳检测所提RNA的完整性:
1.采用普通电泳还是甲醛变性凝胶电泳呢,有人说普通电泳就可以检测了?
2.缓冲液用哪个好呢(TAE,TBE,MOPS)?
3.EB染色的话是加在缓冲液中,还是跑完后再进行染色好呢?
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草蔻年华

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-08-01 12:09:51
1.用普通电泳跑过,180V电压十分钟即可观察结果。
2.用的是TAE
3.用的是Genefinder,直接加在缓冲液里的。
希望对你有帮助。
2楼2013-07-31 17:33:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-08-01 12:09:57
如果只是检查完整性,用普通电泳就行了,不过非变性样品容易在电泳过程中降解,需要注意缓冲液新配置,电泳时间尽量不要长。变性电泳可以更准确的确定条带的分子量,对维持RNA本身在电泳过程中的完整性有帮助。
3楼2013-08-01 00:45:18
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没想象的那么严重,直接用平常的电泳就ok,Good luck!
互助互励,共奋共进!!
4楼2013-08-01 03:42:30
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hc42

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 草蔻年华 at 2013-07-31 17:33:09
1.用普通电泳跑过,180V电压十分钟即可观察结果。
2.用的是TAE
3.用的是Genefinder,直接加在缓冲液里的。
希望对你有帮助。

本人新手,第一次跑,顺便咨询下6x上样缓冲液的配方,要加EDTA吗?配的时候最后是用超纯水定容还是TAE定容呢?
5楼2013-08-01 07:54:53
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