应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA琼脂糖凝胶的问题
101/1返回列表
查看: 2129  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA琼脂糖凝胶的问题

给位虫友，本人刚涉足分子方面，有很多不懂，特在此请教高人
我们实验室跑DNA和RNA的琼脂糖凝胶时，我们实验室都不加上样缓冲液，直接是RNA样品1ul再用去离子水补齐至10ul，上样缓冲液是单独点一个孔，想问一下，这么做和资料上说的样品中加入上样缓冲液效果一样么，还有为什么用水补齐，直接加样不可以么？还有再跑RNA电泳时我们加的是DNA loading buffer而不是RNA loading buffer 来观测跑胶情况，这样也可以？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-17 15:28:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabxxh

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-17 20:00:27
咖啡加点糖(金币+1): 2011-03-29 09:05:45
你说的上样缓冲液单独点一个孔是什么意思，和样品分开的吗？这样倒是没见过，难道你们用的是商业胶条，还是你们用前染或者后染？
样品加入缓冲液是为了把药品沉降到点样孔底部，用水补足是为了好点样，体积不至于太小而飘散到电泳液中，但是分开加loading的，我不知道loading还有什么作用，好看吗？希望楼主搞清楚了大家一起学习
RNA电泳我们一向用DNA Loading，只要是新开封的，上面标上RNA专用就可以了，然后每次用的时候要采用处理过的RNA枪头，电泳液最好换过，这样就不会有什么问题了，而且一般RNA loading里面都有EB，不用为好
好运
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-03-17 16:25:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerry110

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励新虫积极参与交流~~ 2011-03-17 22:04:41
loading和样品混了显蓝色，你们是不是为了省loading还是为了省事，就点一个，我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置，确定合适停止电泳！
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-03-17 19:43:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yabxxh at 2011-03-17 16:25:42:
你说的上样缓冲液单独点一个孔是什么意思，和样品分开的吗？这样倒是没见过，难道你们用的是商业胶条，还是你们用前染或者后染？
样品加入缓冲液是为了把药品沉降到点样孔底部，用水补足是为了好点样，体积不至于 ...

是和样品分开的，提完RNA后要跑胶看起是否会降解或者其降解程度，我们实验室的做法是：取1ul的样用去离子水补齐10ul然后就点样，最后在另一个未点样的孔里点上5ul的DNA loading buffer，然后就跑胶了！就是这样，最近看着方面的资料，发现大家都不是这么做的，所以很不解，难道单纯只是为了做个标志，看跑到一定位置就停电泳？
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-17 20:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jerry110 at 2011-03-17 19:43:08:
loading和样品混了显蓝色，你们是不是为了省loading还是为了省事，就点一个，我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置，确定合适停止电泳！

其实我也很想是这样，要不然呢？呵呵
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-17 20:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piggpi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jerry110 at 2011-03-17 19:43:08:
loading和样品混了显蓝色，你们是不是为了省loading还是为了省事，就点一个，我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置，确定合适停止电泳！

同意这个说法。。。。
这种做法还真是少见，后染有吗？楼主可以发张图片比较直观
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-17 21:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)
呵呵，还真是第一次听说呢。RNA电泳不用MARKER的吗
赞一下 回复此楼
7楼2011-03-17 22:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by piggpi at 2011-03-17 21:56:26:
同意这个说法。。。。
这种做法还真是少见，后染有吗？楼主可以发张图片比较直观

没有，跑完直接在紫外下照相！呵呵，我其实也很不解这种做法
赞一下 回复此楼
8楼2011-03-17 22:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zgb1982 at 2011-03-17 22:24:38:
呵呵，还真是第一次听说呢。RNA电泳不用MARKER的吗

我确定，我们没用！呵呵
赞一下 回复此楼
9楼2011-03-17 22:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)
咖啡加点糖(金币+1): 2011-03-29 09:05:22
RNA电泳时我们加的是DNA loading buffer而不是RNA loading buffer 来观测跑胶情况？？？这个问题，我们实验室一般都用6 x DNA loading buffer。至于前面的问题，我到没听说过
赞一下 回复此楼
10楼2011-03-28 16:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 咖啡加点糖 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303，338分，求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭