24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2156  |  回复: 9

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】RNA琼脂糖凝胶的问题

给位虫友,本人刚涉足分子方面,有很多不懂,特在此请教高人
我们实验室跑DNA和RNA的琼脂糖凝胶时,我们实验室都不加上样缓冲液,直接是RNA样品1ul再用去离子水补齐至10ul,上样缓冲液是单独点一个孔,想问一下,这么做和资料上说的样品中加入上样缓冲液效果一样么,还有为什么用水补齐,直接加样不可以么?还有再跑RNA电泳时我们加的是DNA loading buffer而不是RNA loading buffer 来观测跑胶情况,这样也可以?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabxxh

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-17 20:00:27
咖啡加点糖(金币+1): 2011-03-29 09:05:45
你说的上样缓冲液单独点一个孔是什么意思,和样品分开的吗?这样倒是没见过,难道你们用的是商业胶条,还是你们用前染或者后染?
样品加入缓冲液是为了把药品沉降到点样孔底部,用水补足是为了好点样,体积不至于太小而飘散到电泳液中,但是分开加loading的,我不知道loading还有什么作用,好看吗?希望楼主搞清楚了大家一起学习
RNA电泳我们一向用DNA Loading,只要是新开封的,上面标上RNA专用就可以了,然后每次用的时候要采用处理过的RNA枪头,电泳液最好换过,这样就不会有什么问题了,而且一般RNA loading里面都有EB,不用为好
好运
2楼2011-03-17 16:25:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerry110

新虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励新虫积极参与交流~~ 2011-03-17 22:04:41
loading和样品混了显蓝色,你们是不是为了省loading还是为了省事,就点一个,我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置,确定合适停止电泳!
3楼2011-03-17 19:43:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yabxxh at 2011-03-17 16:25:42:
你说的上样缓冲液单独点一个孔是什么意思,和样品分开的吗?这样倒是没见过,难道你们用的是商业胶条,还是你们用前染或者后染?
样品加入缓冲液是为了把药品沉降到点样孔底部,用水补足是为了好点样,体积不至于 ...

是和样品分开的,提完RNA后要跑胶看起是否会降解或者其降解程度,我们实验室的做法是:取1ul的样用去离子水补齐10ul然后就点样,最后在另一个未点样的孔里点上5ul的DNA loading buffer,然后就跑胶了!就是这样,最近看着方面的资料,发现大家都不是这么做的,所以很不解,难道单纯只是为了做个标志,看跑到一定位置就停电泳?
4楼2011-03-17 20:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jerry110 at 2011-03-17 19:43:08:
loading和样品混了显蓝色,你们是不是为了省loading还是为了省事,就点一个,我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置,确定合适停止电泳!

其实我也很想是这样,要不然呢?呵呵
5楼2011-03-17 20:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piggpi

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jerry110 at 2011-03-17 19:43:08:
loading和样品混了显蓝色,你们是不是为了省loading还是为了省事,就点一个,我觉得点一个是不是为了显示条带大致跑的位置,确定合适停止电泳!

同意这个说法。。。。
这种做法还真是少见,后染有吗?楼主可以发张图片比较直观
6楼2011-03-17 21:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)


呵呵,还真是第一次听说呢。RNA电泳不用MARKER的吗
7楼2011-03-17 22:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by piggpi at 2011-03-17 21:56:26:
同意这个说法。。。。
这种做法还真是少见,后染有吗?楼主可以发张图片比较直观

没有,跑完直接在紫外下照相!呵呵,我其实也很不解这种做法
8楼2011-03-17 22:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by zgb1982 at 2011-03-17 22:24:38:
呵呵,还真是第一次听说呢。RNA电泳不用MARKER的吗

我确定,我们没用!呵呵
9楼2011-03-17 22:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)


咖啡加点糖(金币+1): 2011-03-29 09:05:22
RNA电泳时我们加的是DNA loading buffer而不是RNA loading buffer 来观测跑胶情况???这个问题,我们实验室一般都用6 x DNA loading buffer。至于前面的问题,我到没听说过
10楼2011-03-28 16:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 咖啡加点糖 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研生物与医药调剂 +8 铁憨憨123425 2026-03-31 9/450 2026-04-06 12:52 by lys0704
[考研] 08600生物与医药-327 +8 18755400796 2026-04-05 8/400 2026-04-06 11:59 by lijunpoly
[考研] 求调剂 +5 chenxrlkx 2026-04-05 7/350 2026-04-06 07:54 by houyaoxu
[考研] 271分求调剂学校 +12 zph158488! 2026-04-02 13/650 2026-04-05 10:13 by lqwchd
[考研] 考研调剂 +6 15615482637 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:43 by yu221
[考研] 22408求调剂 354分 可跨专业 +3 hannnnnnn 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:35 by 土木硕士招生
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 求调剂不挑专业 +3 xrh030412 2026-04-01 3/150 2026-04-03 14:40 by 氮气气气
[考研] 321求调剂 +17 y-yh 2026-04-01 20/1000 2026-04-03 12:57 by y-yh
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[考研] 材料考研调剂 +10 Gs大王 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:47 by 遗忘消失的灆
[考研] 309求调剂 +14 呆菇不是戴夫 2026-04-02 14/700 2026-04-03 09:42 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +3 李木子0120 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:45 by dongzh2009
[考研] 一志愿复旦材料,英一专硕,总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 农学考研求调剂 +3 dkdkxm 2026-04-01 3/150 2026-04-02 16:04 by wangjagri
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 4/200 2026-04-01 00:00 by 321*
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
[考研] 085601英二数二求调剂 总分325 +4 余航航 2026-03-31 4/200 2026-03-31 17:38 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见