24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 7682  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1058744774

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!各位帮忙看看,PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图,条带不清晰原因是什么?

各位大侠好,本人刚开始做PCR,帮忙分析一下电泳条带不清晰的原因吧。
图中从左到右是同一DNA模板,不同引物,同一RCR条件的产物
出现这种情况什么原因呢?说明模板有问题?还是需要改变PCR条件,或者增加镁离子浓度?
急!各位帮忙看看,PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图,条带不清晰原因是什么?
DNA.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验 实验求助

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1058744774

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-30 23:20:50
是用gDNA为模板?引物的退火温度优化了没有?

是gDNA.退火温度是36℃,40个循环。优化退火温度是根据这个公式吗?Tm=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~8)
7楼2013-07-31 09:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

TPR有点叼

金虫 (正式写手)



myprayer: 金币+1, 分子生物期待你得精彩! 2013-07-30 23:16:33
路过。听说不亮,不清晰也有没P好的原因。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-07-30 22:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是用gDNA为模板?引物的退火温度优化了没有?
3楼2013-07-30 23:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rth1983

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-07-31 14:03:52
你是在筛选引物吗?有的时候一些引物扩出来就这个样子,需要重新设计。不过如果你能确定这个引物扩增你的样品可以获得清晰的条带,可以优化一下PCR条件。镁离子浓度啥的到不用改,体系就用你们实验室的成熟的体系。可以优化下退火温度,时间等。不过有的时候模板不好也会这样。。
4楼2013-07-31 03:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 083000学硕274求调剂 +10 Li李鱼 2026-03-26 10/500 2026-03-31 03:31 by 蒙奇奇521
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +3 @taotao 2026-03-30 3/150 2026-03-31 00:13 by jp9609
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +4 Gymno 2026-03-30 4/200 2026-03-30 23:07 by ms629
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 08工科求调剂286 +4 tgs_001 2026-03-28 4/200 2026-03-30 21:03 by dophin1985
[考研] 304材料求调剂 +5 钟llll 2026-03-26 5/250 2026-03-30 19:37 by 源_2020
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +10 举个栗子oi 2026-03-24 11/550 2026-03-30 19:31 by michael2011
[考研] 287求调剂 +14 land xuxu 2026-03-26 14/700 2026-03-30 18:38 by 544594351
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-26 11/550 2026-03-30 14:27 by JourneyLucky
[基金申请] 面上5B能上会吗? +7 redcom 2026-03-29 7/350 2026-03-30 12:44 by 爱搞研究的小孩
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 调剂310 +12 温柔的晚安 2026-03-25 13/650 2026-03-29 20:01 by 无际的草原
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么! 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
信息提示
请填处理意见