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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳跑质粒图分析
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monkeyboby

新虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳跑质粒图分析

1  100bp marker                    2ul
2   100ng/ul 质粒DNA             2ul
3    500ng/ul质粒DNA             2ul
4     200bp  marker                 2ul
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1楼 2013-01-21 20:15:58
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monkeyboby

新虫 (初入文坛)
电压值是105v
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2楼2013-01-21 20:48:35
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木小默

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先我想请你看看的琼脂糖胶制的是否符合标准，倒胶的时候沿着一边倒，以保证胶的浓度基本一致，其次就是跑胶的电压和电流，我们一般采用120V的电压，400mA的电流，跑大概25分钟左右就可以了，还有就是电泳的缓冲液，建议你再跑之前将其换成新的。祝你成功喽！！
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3楼2013-01-21 21:52:50
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monkeyboby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木小默 at 2013-01-21 21:52:50
首先我想请你看看的琼脂糖胶制的是否符合标准，倒胶的时候沿着一边倒，以保证胶的浓度基本一致，其次就是跑胶的电压和电流，我们一般采用120V的电压，400mA的电流，跑大概25分钟左右就可以了，还有就是电泳的缓冲液 ...

用Gold view 5ul+100ml TAE 泡染法，30分钟，是不是染料加的少呀？或者样品的量少?   或者胶的浓度不均匀
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4楼2013-01-22 00:28:12
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
觉得是胶没制好或者的电泳缓冲液不行了。做胶的时候把琼脂糖化均一，把电泳缓冲液换一下。电泳时缓冲液要没过胶面。你的样品量已经不少了，一般有~100ng的DNA就有很不错的带了。
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5楼2013-01-22 02:43:25
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monkeyboby

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-22 02:43:25
觉得是胶没制好或者的电泳缓冲液不行了。做胶的时候把琼脂糖化均一，把电泳缓冲液换一下。电泳时缓冲液要没过胶面。你的样品量已经不少了，一般有~100ng的DNA就有很不错的带了。

嗯，好的，万分感谢！
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6楼2013-01-22 10:18:01
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zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个梳子是用于制备的，选用瘦一点的！
梳子使用前檫干净，拔起来轻点
然后你再跑胶试试
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shine
7楼2013-01-22 15:48:42
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