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1058744774

新虫 (初入文坛)

[求助] 急！各位帮忙看看，PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图，条带不清晰原因是什么？

各位大侠好，本人刚开始做PCR,帮忙分析一下电泳条带不清晰的原因吧。
图中从左到右是同一DNA模板，不同引物，同一RCR条件的产物
出现这种情况什么原因呢？说明模板有问题？还是需要改变PCR条件，或者增加镁离子浓度？
急！各位帮忙看看，PCR后跑的琼脂糖凝胶电泳图，条带不清晰原因是什么？
DNA.jpg
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1楼2013-07-30 22:50:44
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rth1983

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-07-31 14:03:52
你是在筛选引物吗？有的时候一些引物扩出来就这个样子，需要重新设计。不过如果你能确定这个引物扩增你的样品可以获得清晰的条带，可以优化一下PCR条件。镁离子浓度啥的到不用改，体系就用你们实验室的成熟的体系。可以优化下退火温度，时间等。不过有的时候模板不好也会这样。。
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4楼2013-07-31 03:21:28
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rth1983

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1058744774 at 2013-07-31 09:42:30
我现在最想确定是不是模板的问题，如果是模板有问题那么第五个引物的条带为什么是清晰的呢，谢谢指教。...

统一模版的话，应该没有问题，36度的退火温度太低了。。
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13楼2013-07-31 13:19:32
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