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641306250

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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帖子: 3
在线: 24.6小时
虫号: 2472306
注册: 2013-05-20
专业: 植物病理学

[求助] 做病毒检测，PCR跑胶500bp处总是有条带

我做病毒检测，本来目的条带是在200左右才对，但是琼脂糖凝胶电泳后500bp的地方总是有条带，重复N遍了，而且检测的不是一种病毒，图上这些孔一共检测了3种病毒，但是很诡异的500bp的地方总是有条带，而且加样越多条带越亮。PCR体系是25微升的，CDNA2微，引物正反向各0.5微，extaq0.2微，10倍buffer2.5微，dNTp2微，dd水17.3，之前一直用这个体系，都没问题，但是最近总是出这种问题。希望诸位高手给解释下。

做病毒检测，PCR跑胶500bp处总是有条带

433-Gel 2013-07-04 20hr 22min.jpg

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1楼2013-07-04 20:43:22

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zhouking8758

木虫 (正式写手)

应助: 18 (小学生)
金币: 2418.5
散金: 27
红花: 2
帖子: 369
在线: 289.9小时
虫号: 691834
注册: 2009-01-12
专业: 生物大分子结构与功能

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:05:56

没有阴性对照无法清楚的解释问题出在哪。
先用水做阴性对照，如何还出现这样的现象，就是你的引物或者其它试剂的问题。逐一更换寻找原因。
但是这样很费时间，还不如干脆重新换新的试剂

4楼2013-07-05 10:25:02

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