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新虫 (初入文坛)

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专业: 植物病理学

[求助] 做病毒检测，PCR跑胶500bp处总是有条带

我做病毒检测，本来目的条带是在200左右才对，但是琼脂糖凝胶电泳后500bp的地方总是有条带，重复N遍了，而且检测的不是一种病毒，图上这些孔一共检测了3种病毒，但是很诡异的500bp的地方总是有条带，而且加样越多条带越亮。PCR体系是25微升的，CDNA2微，引物正反向各0.5微，extaq0.2微，10倍buffer2.5微，dNTp2微，dd水17.3，之前一直用这个体系，都没问题，但是最近总是出这种问题。希望诸位高手给解释下。

做病毒检测，PCR跑胶500bp处总是有条带

433-Gel 2013-07-04 20hr 22min.jpg

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1楼 2013-07-04 20:43:22

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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 应用高分子化学与物理

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:05:44

建议加上一些control的样品，作一个小的DOE, 例如没有cDNA，看看是不是引物自身的问题
或者换一下buffer看看是不是TAE的问题

3楼2013-07-05 08:25:17

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