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蜂鸟404

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 质粒丢失了一段怎么办

最近要用一个质粒,是一种特殊质粒,市场上买不到,可是测序发现该质粒缺少了三四十bp的片段,而确实的正好是复制子部分,现在不能用了,求助各位大侠怎么把缺失的补上,这个质粒很重要,不胜感激
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 蜂鸟404 at 2013-06-26 09:36:00
这是一个穿梭质粒,在大肠里的复制起始还在,你这个我没想过,不知道引物太长容不容易成功...

59bp以下引物合成都是一样的价格哈~
7楼2013-06-26 12:44:05
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查看全部 7 个回答

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-25 10:31:28
第一、确定是质粒缺少了一段
第二、确定质粒真的没用
第三、送公司构建质粒
实验顺利~
总有一天我要修改用户名。
2楼2013-06-25 10:07:21
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-26 12:31:47
overlap pcr 设计长引物把确实的补上。。再连接测序
3楼2013-06-25 10:44:07
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-26 12:31:54
可以重新构建下质粒试试,在缺失的地方加两个酶切位点。
再测序,试试,祝好运
4楼2013-06-25 10:54:49
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