应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选问题
111/2返回列表12下一页
查看: 2252  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

易翔仪冲

新虫 (初入文坛)

[交流] 蓝白斑筛选问题 已有5人参与

昨天涂得板子，今天一看一片蓝色，（白色菌落刚拿出来的时候好像有那么几个，不知道放4度放一段时间之后会不会变蓝），是不是因为涂得X-gal浓度多了一倍？
望高人指点！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-12 10:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yujitianqing

铁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-12 21:00:10
从蓝白斑筛选原理来说，这与所加过量的X-gal 无关，与载体是否插入目的片段相关……
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

易翔仪冲
2楼2013-06-12 13:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cute_man

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按照操作来，应该是没有问题的。跟x-gal关系不大，不过一片蓝色，你的涂板浓度可能太大，加个抗生素筛选会好很多的。
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-13 21:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

易翔仪冲

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-06-12 13:51:49
从蓝白斑筛选原理来说，这与所加过量的X-gal 无关，与载体是否插入目的片段相关……

好的~~，谢谢！
回复此楼
4楼2013-06-14 09:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

易翔仪冲

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-06-12 13:51:49
从蓝白斑筛选原理来说，这与所加过量的X-gal 无关，与载体是否插入目的片段相关……

我连接的是T载体，一般来说不是很好连的，我怎么就连不上呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-14 09:47:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujitianqing

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 易翔仪冲 at 2013-06-14 09:47:50
我连接的是T载体，一般来说不是很好连的，我怎么就连不上呢？...

如果你用的试剂盒，还是比较容易的。如果目的片段比较大，就不容易连接。连接酶质量、连接的条件、目的基因、载体浓度及比例也可能影响连接效率。
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-17 12:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-06-17 12:18:08
如果你用的试剂盒，还是比较容易的。如果目的片段比较大，就不容易连接。连接酶质量、连接的条件、目的基因、载体浓度及比例也可能影响连接效率。...

请问和T载体链接也要连接酶吗？不是按照说明书T-vector,自己的片段，solution就可以了吗？我一直连不上去，不知道什么原因了。
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-17 20:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2013-06-17 21:50:40
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

yujitianqing

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2013-06-17 20:32:34
请问和T载体链接也要连接酶吗？不是按照说明书T-vector,自己的片段，solution就可以了吗？我一直连不上去，不知道什么原因了。...

当然需要连接酶，否则3’-5’磷酸二酯键难以自行连接，有些公司直接将酶和缓冲液混合好了，做的时候就不需要分开再加连接酶。连接不上原因很多。
赞一下 回复此楼
9楼2013-06-17 22:14:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

稀巴烂

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我都是放4度放了两三天让其显色，不然很容易挑到蓝斑，如果一大片蓝色，楼主要么还是重新连接转化吧~呵呵
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-18 15:42:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 易翔仪冲 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +6 Isak0320 2026-10-12 8/400 2026-10-12 20:09 by caixiaoye1
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 8/400 2026-10-12 18:09 by wangyl_123
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭