应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况
51/1返回列表
查看: 8383  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ljx2ljx

新虫 (初入文坛)

[求助] 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况 已有1人参与

如题，我用TAKARA的DH5a, PMD18做克隆，按照试剂盒说明进行，载体与插入DNA分子按照3：1进行连接，16度三十分钟（也做过四个小时），以空载质粒作对照，37度培养14-16个小时，没有出现东西（20个小时候看到平板边缘出现小透明菌斑，中央好像菌落连在一片），但是空载质粒对照没有篮斑出现，请问这是什么原因？

[ Last edited by ljx2ljx on 2013-6-2 at 21:52 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-02 21:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不长菌估计是感受态不行，或者氨苄浓度过高。感受态不好的可能性最大。
如果长的菌落正常，但是都是白斑，可能就是IPTG或者x-gal有问题。
赞一下 回复此楼
8楼2013-06-04 23:22:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljx2ljx(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-03 18:27:46
你做的是TA克隆？空的T载体不自连是好事吧。20小时培养时间太长了，可能是板上的氨苄失效了。没有蓝斑有可能是筛选药品的问题，你应该用一个pUC18之类的质粒做对照。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-03 01:35:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljx2ljx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-03 01:35:33
你做的是TA克隆？空的T载体不自连是好事吧。20小时培养时间太长了，可能是板上的氨苄失效了。没有蓝斑有可能是筛选药品的问题，你应该用一个pUC18之类的质粒做对照。

我做的是TA克隆，用的是PUC19质粒做对照，但是没有看到篮斑。甚至有些时候干脆都没有长菌落。
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-03 08:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljx2ljx(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-06-03 18:27:56
我前一段时间也在做蓝白斑筛选，一开始做的时候平板上长得也全是白斑，没有蓝斑，但是酶切鉴定时没有目的条带，最近情况有所好转，个人觉得应该是你转化的问题，在者就是你的连接体系中目的片段与载体的量的问题，
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-03 09:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 320求调剂 +6 深郊akm 2026-04-17 6/300 2026-04-20 18:57 by fs26jie
[论文投稿] 期刊推荐 +3 材料研究生 2026-04-15 5/250 2026-04-20 16:02 by 豆豆7758
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 5/250 2026-04-20 10:47 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 291求调剂 +12 关忆北. 2026-04-14 13/650 2026-04-19 16:50 by 中豫男
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +10 lzmk 2026-04-14 11/550 2026-04-19 16:42 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 一志愿沪9，生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭