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克隆筛选时 有关卡那霉素抗性菌落鉴定的一个问题
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如题，本人第一次做卡那霉素抗性的克隆筛选实验，昨天下午5点多开始培养的细菌，今早发现卡那平板上长了10来颗个体很大的菌落，和我以前做的氨苄板的菌落明显不同，只有1个菌落是正常大小的，请问是不是卡那霉素实验的培养时间不能这么长，要比氨苄板时间短些？或者说我的这些大个体菌落，都是杂菌？因为我听说环境中带有卡那的菌比氨苄多很多，是这样吗？谢谢 实验载体是重组的pet28a |
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5楼2013-01-09 08:03:58
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各位大侠好 我也是第一次用kana做筛选试验，我的质粒是lana，宿主菌是DH5.我遇到的问题很怪的：1.加有kana的液体培养基中经过摇菌长出细菌了，但是在加有kana的固体培养基分区划线后却长不出细菌，2.更奇怪的是培养基的底层还有类似气泡的小东西，刚开始还以为是菌落，最后看好像是培养基凹进去。3.我从长菌的液体培养基中取出一环分区划线，可是线上出现了很多液体，不一会时间，又在底层出现气泡似的东西。 我已经重复做了两次，培养基也是重新做的。为什么还是不行？ 还有，我用的kana是硫酸卡那霉素，会有影响吗？终浓度用的50ug/ml. 各位大哥大姐，帮帮忙了，我快愁死了。谢谢谢谢！ |
6楼2013-05-13 22:38:46
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