应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况
51/1返回列表
查看: 8702  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ljx2ljx

新虫 (初入文坛)

[求助] 蓝白斑筛选没有菌落，或者都是白斑，是什么情况 已有1人参与

如题，我用TAKARA的DH5a, PMD18做克隆，按照试剂盒说明进行，载体与插入DNA分子按照3：1进行连接，16度三十分钟（也做过四个小时），以空载质粒作对照，37度培养14-16个小时，没有出现东西（20个小时候看到平板边缘出现小透明菌斑，中央好像菌落连在一片），但是空载质粒对照没有篮斑出现，请问这是什么原因？

[ Last edited by ljx2ljx on 2013-6-2 at 21:52 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-02 21:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王者归来001

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般空质粒的蓝斑需要时间稍长一些才会出现，按照合适的比例连接一般都会连上，所以基本上都是白斑。
赞一下 回复此楼
坚持不懈,终会成功!
7楼2013-06-04 23:09:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljx2ljx(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-03 18:27:46
你做的是TA克隆？空的T载体不自连是好事吧。20小时培养时间太长了，可能是板上的氨苄失效了。没有蓝斑有可能是筛选药品的问题，你应该用一个pUC18之类的质粒做对照。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-03 01:35:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljx2ljx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-03 01:35:33
你做的是TA克隆？空的T载体不自连是好事吧。20小时培养时间太长了，可能是板上的氨苄失效了。没有蓝斑有可能是筛选药品的问题，你应该用一个pUC18之类的质粒做对照。

我做的是TA克隆，用的是PUC19质粒做对照，但是没有看到篮斑。甚至有些时候干脆都没有长菌落。
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-03 08:57:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ljx2ljx(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-06-03 18:27:56
我前一段时间也在做蓝白斑筛选，一开始做的时候平板上长得也全是白斑，没有蓝斑，但是酶切鉴定时没有目的条带，最近情况有所好转，个人觉得应该是你转化的问题，在者就是你的连接体系中目的片段与载体的量的问题，
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-03 09:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-18 12:40 by hkwFQxvyQgWN
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-18 11:30 by HjTo14L7GlnE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-18 11:18 by HjTo14L7GlnE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-18 10:30 by yS4CkeWDhD6V
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-18 10:16 by yS4CkeWDhD6V
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-18 09:04 by yS4CkeWDhD6V
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:42 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-18 02:54 by cITaGg3p5edr
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-18 02:28 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-18 01:40 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-18 00:28 by cITaGg3p5edr
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-17 23:05 by cuPZTDXS3VOd
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-17 22:05 by cuPZTDXS3VOd
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:15 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 4/200 2026-09-17 06:26 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:28 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭