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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR出现杂带
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] PCR出现杂带

最近实验出现了一个问题，想向大家请教一下。
     PCR结果出现了目的条带和一条杂带，杂带和目的条带隔得很近，且亮度差不多，提高退火温度也未见起色，PCR的模板是人肝细胞的一个基因，要怎样才能得到目的条带呢？或者能直接切胶回收不？
   请求各位大侠帮忙，小女子感激不尽！
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2013-03-22 08:35:56
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hj890509

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接切胶回收后以回收产物为模板进行扩增就是一条带了
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2楼2013-03-22 09:09:59
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xikexiao

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2013-03-22 09:23:07
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阳光灰灰

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是引物特异性不太好，换个引物试试~
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4楼2013-03-22 09:48:44
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉的也是重新设计一对引物重新扩增。
或者用2%的胶跑的开一些在切胶。
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5楼2013-03-22 10:50:51
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majily

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不管杂带 直接将目的条带切胶回收 另外 如果离得很近的话 你两个分别回收吧 没准备哪个是目的条带呢 到时候测测序 看看
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既然选择了远方就要在风雨中飞翔
6楼2013-03-22 10:53:17
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
4楼: Originally posted by 阳光灰灰 at 2013-03-22 09:48:44
是不是引物特异性不太好，换个引物试试~

嗯，觉得也是引物的原因，可还真不想重新去设计引物。。。
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
7楼2013-03-25 17:44:12
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-03-22 10:50:51
我觉的也是重新设计一对引物重新扩增。
或者用2%的胶跑的开一些在切胶。

嗯，重新设计印务有点麻烦，用2%的胶试试看吧
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
8楼2013-03-25 17:45:00
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阳光灰灰

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wu-ke-da at 2013-03-25 17:44:12
嗯，觉得也是引物的原因，可还真不想重新去设计引物。。。...

看楼主啦，要是排除了其他因素还是不行，那就只有换引物了，也许效率一下子就上来啦，嘿嘿~~
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9楼2013-03-26 10:57:49
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