应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物双酶切遇到问题，求救！！！
31/1返回列表
查看: 1798  |  回复: 7
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] PCR产物双酶切遇到问题，求救！！！

各位虫友们
我在做完PCR之后检测得到目的条带，经过切胶回收后检测条带很亮，之后用BamH1和Xho1进行双酶切，发现什么都没有了，条带貌似是没有跑过，什么都没有哇。
为了检验问题，我将空pET28a载体分别用BamH1和Xho1进行单酶切，都能切动。
我用的是PRIME STAR PREMIX进行的PCR。
酶切体系是：
总：30μl
ddH2O：11
10*K：3
片段：15
BamH1/Xho1：0.5/0.5
我使用的酶切条件是，37℃1.5h。
请问各位虫友，这是怎么回事？是PCR片段的问题吗？

[ Last edited by 转基因猴子 on 2013-3-15 at 15:25 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我还年轻，我要上路！
1楼 2013-03-15 15:23:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cfr1990 at 2013-03-15 16:27:28
跑胶时间控制在20分钟试试看

跑胶我用90V25MIN
赞一下 回复此楼
我还年轻，我要上路！
4楼2013-03-15 19:58:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 转基因猴子 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭