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bob1987

铁虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物跑胶结果 已有10人参与

大家好,这是我最近做的PCR结果,跑胶结果出现了如图所示的结果,这是跑胶问题还是我的PCR的问题。
PCR产物跑胶结果
2013.8.29 PCR.jpg
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ninjakiss

银虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-29 18:08:28
胶的浓度不均匀吧。。。至少认为你制的胶铁定有问题。胶可能没有热均匀或者没有凝固好便跑胶导致变形。至于PCR,我感觉可能也有问题(如果没有问题,至少也要扭曲出个条带啊)。重新P一下吧。
2楼2013-08-29 16:38:20
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普通回帖

牧炀

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2013-08-29 21:19:55
据以前的经验是可能为电压不稳、胶液没配好  而且样品都飘出来了...重新跑电泳吧吧。
3楼2013-08-29 16:51:09
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putine

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 21:20:11
胶的问题,不是很均匀。maker跑的也很不好。不知道你的PCR大小产物是不是在maker从上往下数第5条亮带附近,如果是的话PCR问题不大
4楼2013-08-29 17:04:36
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南海所老龚

新虫 (正式写手)

★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 21:20:18
很明显是胶的问题,没匀。加热时间稍长一点。
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
5楼2013-08-29 21:07:32
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bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

缓冲液该换了吧
来是偶然,去是必然。
6楼2013-08-29 22:02:13
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ayeqiu

木虫 (小有名气)

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极品!
胶要煮均匀,最好是等到不烫手的时候再倒胶到制胶板上
7楼2013-08-31 09:36:47
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ljb19831120

木虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
配胶的时候没全溶解或是没有混匀
8楼2013-08-31 09:47:15
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就这样子1990

银虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
胶没制好,如果样品没降解,体系温度没问题的话pcr 建议查看一下你的酶是否有问题,可以做个阳性和阴性对照
9楼2013-08-31 10:11:24
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yuxiumin565

金虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得胶的问题不是主要问题,可能你PCR的体系中buffer是不有问题,或者其他体系中的问题。祝顺利!
10楼2013-08-31 13:12:46
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