| 查看: 1494 | 回复: 12 | ||
[求助]
western-blot求助，急急急！！求指点求建议！！！
|
||
|
做了两个月了，刚开始没一点信号后来好不容易有信号了可是整个泳道都亮，发帖有亲们说是上样量太大还有亲说2抗浓度太大，结果做了上样量梯度和抗体浓度梯度都没有什么改善，上图几张希望懂的亲们细心看完给予指点……7个不同的处理不要求目标条带，就看不同处理蛋白质表达量的不同，染过转膜后的胶基本没问题，第一张是每孔上35μL样品，二抗1：40，第二张是做的上样量梯度从左到右依次是30μL、25μL、20μL、15μL、10μL、5μL、2μL上样量最小的2个都没信号，10微升的又是没条带的地方也亮 第三张图是2抗浓度梯度左边是1:80，中间1:100，最右边1:200后边2个浓度干脆就没信号了……我实在是走投无路不知道该肿么办，封闭25°摇床一个小时一抗4°过夜，PBS/T洗4次每次15分钟，二抗25°一个半小时PBS/T洗4次每次15分钟……求指点！！  dell 2013-01-16  dell 2013-01-18 12 小时 08 分钟_Exposure_116.8sec.jpg  dell 2013-01-21 12 小时 56 分钟_Exposure_180.0sec.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有191人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Western blot 有没有大仙做过Cleaved caspase-3(17kD),求操作经验啊！
已经有11人回复
- 有没有人用Western blot在做17kDa蛋白质,求经验！！！
已经有22人回复
- 求助：AB-8树脂在用碱处理是溶液发黄，求高手指点！！！
已经有7人回复
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- western blot时marker问题求助
已经有18人回复
- Western blot中出现的问题-求高手指点
已经有17人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 新手求助western blot
已经有22人回复
- 【求助】western blot 湿转 缓冲液 甲醇作用
已经有8人回复
- 【求助/交流】westernblot
已经有10人回复
- 【求助/交流】western blot 缺带 断带
已经有21人回复
- 【求助/交流】western blot
已经有35人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】western blot 显影后发现条带中空，求解答。
已经有8人回复
- 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀
已经有10人回复
- 【求助/交流】western blot 一直都跑不出来，不知道原因，大侠给分析一下啊！？
已经有13人回复
- 【求助/交流】请教Western blot出现非特异性条带的怎么解决
已经有8人回复
- 【求助】mcm-41的xrd，求高手指点
已经有32人回复
- 【求助/交流】western blot中，蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗，怎么还能和一抗结合？
已经有13人回复
- 【求助/交流】western blot 的一抗二抗由来？
已经有4人回复
- 【求助/交流】western blot用奶粉封闭的原理
已经有18人回复
hxswdl
至尊木虫 (文坛精英)
Tortoise
- 应助: 15 (小学生)
- 贵宾: 2.473
- 金币: 25960.2
- 散金: 52382
- 红花: 399
- 沙发: 46
- 帖子: 13021
- 在线: 1879.7小时
- 虫号: 1764206
- 注册: 2012-04-18
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
6楼2013-01-21 19:08:12
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
10楼2013-01-22 11:39:49
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-01-21 15:49:04
hxswdl
至尊木虫 (文坛精英)
Tortoise
- 应助: 15 (小学生)
- 贵宾: 2.473
- 金币: 25960.2
- 散金: 52382
- 红花: 399
- 沙发: 46
- 帖子: 13021
- 在线: 1879.7小时
- 虫号: 1764206
- 注册: 2012-04-18
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
3楼2013-01-21 15:54:44
4楼2013-01-21 16:22:57
5楼2013-01-21 16:24:33
7楼2013-01-21 19:43:41
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
8楼2013-01-22 02:21:11
9楼2013-01-22 11:23:02
40