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HIS TAG能否纯化容易被氧化的蛋白？
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对于一些容易被氧化的蛋白，个人建议最好别用His Tag。这些蛋白在纯化过程中，要加入还原剂防止蛋白被氧化，IMAC是比较忌讳这些还原剂的，当然你可以选用tris-(2- carboxylethyl)-phosphine(TCEP)作为还原剂，因为它不还原金属离子，但成本太高了。这些容易被氧化的蛋白，特别是一些激酶，在加了His Tag 后，会在纯化过程中，显得很不安分，经常会形成沉淀，不容易被浓缩。遇到这些让人头疼的问题该怎么办？要么放弃亲和纯化方法，选用离子层析等其他纯化方法；要么放弃His Tag，选用其他Tag。 看到这么一段话，请教各位，如果我要纯化容易被氧化的蛋白，有什么好方法呢？除了HIS TAG还有什么TAG好用呢？ |
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多谢，想着也给你加金币的，但提示级别不够。。6楼2013-01-15 15:02:52
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