| 查看: 1293 | 回复: 6 | ||
我是传奇456金虫 (正式写手)
|
[求助]
HIS TAG能否纯化容易被氧化的蛋白？
|
|
对于一些容易被氧化的蛋白，个人建议最好别用His Tag。这些蛋白在纯化过程中，要加入还原剂防止蛋白被氧化，IMAC是比较忌讳这些还原剂的，当然你可以选用tris-(2- carboxylethyl)-phosphine(TCEP)作为还原剂，因为它不还原金属离子，但成本太高了。这些容易被氧化的蛋白，特别是一些激酶，在加了His Tag 后，会在纯化过程中，显得很不安分，经常会形成沉淀，不容易被浓缩。遇到这些让人头疼的问题该怎么办？要么放弃亲和纯化方法，选用离子层析等其他纯化方法；要么放弃His Tag，选用其他Tag。 看到这么一段话，请教各位，如果我要纯化容易被氧化的蛋白，有什么好方法呢？除了HIS TAG还有什么TAG好用呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 离子交换色谱法能否成功纯化蛋白是依据于蛋白质的等电点”请问这句话是否正确？
已经有3人回复
- His Tag融合蛋白纯化
已经有8人回复
- 蛋白纯化标签有哪些?
已经有6人回复
- His标签的蛋白纯化柱子
已经有10人回复
- 带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
已经有20人回复
- 关于E-tag标记蛋白的纯化问题！~求助，谢谢帮忙~！
已经有9人回复
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- 镍柱纯化带his标签的蛋白，柱堵了
已经有6人回复
- 透析后蛋白沉淀
已经有18人回复
- 蛋白质原液里那些氨基酸残基容易被氧化?
已经有7人回复
- 肉桂醛在空气中非常容易被氧化 该如何提纯
已经有3人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- 关于his-tag蛋白的分离和纯化 微生物产生！文献多多益善
已经有10人回复
- 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
已经有10人回复
- 使用NOVAGEN的His-tag蛋白纯化柱出现的问题
已经有3人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 纯化后的蛋白做western，出现很明显的两条带，请问是二聚体吗？怎么打开成单体？
已经有11人回复
- GST融合蛋白纯化求助 ！！！
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于his-tagged 蛋白纯化
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教一个his-tag蛋白质纯化问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化？
已经有14人回复
- 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带？
已经有20人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-01-15 09:03:24
我是传奇456
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1480.6
- 红花: 2
- 帖子: 456
- 在线: 211.6小时
- 虫号: 1867241
- 注册: 2012-06-22
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
3楼2013-01-15 09:20:25
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-01-15 09:37:39
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
5楼2013-01-15 10:26:29
我是传奇456
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1480.6
- 红花: 2
- 帖子: 456
- 在线: 211.6小时
- 虫号: 1867241
- 注册: 2012-06-22
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
多谢，想着也给你加金币的，但提示级别不够。。 6楼2013-01-15 15:02:52
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
7楼2013-01-16 10:38:38
