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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 镍柱纯化带his标签的蛋白，柱堵了
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zqf523

新虫 (小有名气)

[求助] 镍柱纯化带his标签的蛋白，柱堵了

镍柱纯化带his标签的蛋白，柱堵了，流速很慢，怎样清洗柱子？（估计是超声破碎离心的时间不够，上清中带有沉淀）
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1楼 2012-04-26 17:05:38
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
过柱之前没离心吗
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2楼2012-04-26 17:58:35
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guojixingok

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-27 08:24:04
是用机子纯化的吗？用0.5M的NaOH处理一下试试，机器的话就用0.45的滤膜过滤一下再用，然后在用大量去离子水处理。手纯直接用。
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3楼2012-04-26 18:31:47
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 专家考核, Good！专家辛苦哈~ 2012-04-26 21:46:34
直接用0.2-0.5M NaOH清洗柱子，如果洗不动，把填料弄出来NaOH处理，然后重新装柱。
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4楼2012-04-26 20:12:56
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zqf523

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-04-26 17:58:35:
过柱之前没离心吗

离了，貌似得是离心的时间不够
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5楼2012-04-28 14:54:22
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zqf523

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by guojixingok at 2012-04-26 18:31:47:
是用机子纯化的吗？用0.5M的NaOH处理一下试试，机器的话就用0.45的滤膜过滤一下再用，然后在用大量去离子水处理。手纯直接用。

谢谢
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6楼2012-04-28 14:54:34
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zqf523

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-04-26 20:12:56:
直接用0.2-0.5M NaOH清洗柱子，如果洗不动，把填料弄出来NaOH处理，然后重新装柱。

谢谢
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7楼2012-04-28 14:54:53
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