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amon7788

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 12
帖子: 30
在线: 8.7小时
虫号: 1262902
注册: 2011-04-12
性别: MM
专业: 环境微生物学

[交流] 有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗？已有3人参与

有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗？
为什么我的蛋白不挂柱呢？
试了很多方法都没用
有别的方法纯化吗

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花枝春满，天心月圆

1楼 2011-09-07 11:15:58

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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

BioEPI: 4
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注册: 2008-04-19
性别: MM
专业: 全球变化生态学

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流~！ 2011-09-07 13:11:38
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:51
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:53
silicare(BioEPI-1): 系统故障 2011-09-08 14:19:18

有可能tag没有暴露出来吧。
你可以试试取部分加尿素变性后过柱，看能不能挂，能挂的话肯定tag被折叠到内部去了。
把tag换到蛋白的另一端，或者变性纯化后复性。
或者用其他方法如IEC、HIC纯化吧。