24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1284  |  回复: 4
本帖产生 2 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

amon7788

新虫 (初入文坛)

[交流] 有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗? 已有3人参与

有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗?
为什么我的蛋白不挂柱呢?
试了很多方法都没用
有别的方法纯化吗
回复此楼
花枝春满,天心月圆
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+4, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:40
还有就是如果蛋白质较大的话容易形成空间位阻,不利于二者的结合,如果你是实验室规模,单纯为了得到些样品,可以采用上样时延长上样时间来解决这个问题,延长二者的结合时间,能够增加结合效果。这也是实验室常用的方法
4楼2011-09-07 21:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流~! 2011-09-07 13:11:38
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:51
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:53
silicare(BioEPI-1): 系统故障 2011-09-08 14:19:18
有可能tag没有暴露出来吧。
你可以试试取部分加尿素变性后过柱,看能不能挂,能挂的话肯定tag被折叠到内部去了。
把tag换到蛋白的另一端,或者变性纯化后复性。
或者用其他方法如IEC、HIC纯化吧。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
2楼2011-09-07 12:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
蛋白质纯化的方法很多,有的时候没有必要非得加标签,如果不要标签的话还需要酶切,建议采用其他方法试试,比如例子交换,疏水等都是很常用且有效的方法,相对纯了后再做可能对目标蛋白在什么情况下能够结合更容易判断。希望对你能有作用。
3楼2011-09-07 21:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291分调剂 +10 上岸小莹加油 2026-04-09 11/550 2026-04-15 19:51 by 学习:)
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 生物学调剂 +9 纸扇zhishan 2026-04-13 9/450 2026-04-15 18:28 by AN流800
[考研] 284求调剂 +20 让我上岸吧阿西 2026-04-09 20/1000 2026-04-15 14:40 by 黑科技花岗岩
[考博] 26年电池方向博士申请 10+3 15615939259 2026-04-09 4/200 2026-04-15 14:22 by kwansei
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 6/300 2026-04-14 16:40 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 0854调剂 +12 长弓傲 2026-04-09 13/650 2026-04-12 09:56 by 逆水乘风
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
信息提示
请填处理意见