24小时热门版块排行榜    

查看: 1248  |  回复: 4
本帖产生 2 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

amon7788

新虫 (初入文坛)

[交流] 有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗? 已有3人参与

有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗?
为什么我的蛋白不挂柱呢?
试了很多方法都没用
有别的方法纯化吗
回复此楼
花枝春满,天心月圆
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
蛋白质纯化的方法很多,有的时候没有必要非得加标签,如果不要标签的话还需要酶切,建议采用其他方法试试,比如例子交换,疏水等都是很常用且有效的方法,相对纯了后再做可能对目标蛋白在什么情况下能够结合更容易判断。希望对你能有作用。
3楼2011-09-07 21:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流~! 2011-09-07 13:11:38
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:51
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:53
silicare(BioEPI-1): 系统故障 2011-09-08 14:19:18
有可能tag没有暴露出来吧。
你可以试试取部分加尿素变性后过柱,看能不能挂,能挂的话肯定tag被折叠到内部去了。
把tag换到蛋白的另一端,或者变性纯化后复性。
或者用其他方法如IEC、HIC纯化吧。
生物资源交流QQ群:1044518333
2楼2011-09-07 12:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+4, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:40
还有就是如果蛋白质较大的话容易形成空间位阻,不利于二者的结合,如果你是实验室规模,单纯为了得到些样品,可以采用上样时延长上样时间来解决这个问题,延长二者的结合时间,能够增加结合效果。这也是实验室常用的方法
4楼2011-09-07 21:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见