24小时热门版块排行榜    

查看: 1249  |  回复: 4
本帖产生 2 个 BioEPI ,点击这里进行查看

amon7788

新虫 (初入文坛)

[交流] 有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗? 已有3人参与

有人用镍柱纯化130 kD以上的大蛋白的吗?
为什么我的蛋白不挂柱呢?
试了很多方法都没用
有别的方法纯化吗
回复此楼
花枝春满,天心月圆
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 感谢交流~! 2011-09-07 13:11:38
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:51
silicare(BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:53
silicare(BioEPI-1): 系统故障 2011-09-08 14:19:18
有可能tag没有暴露出来吧。
你可以试试取部分加尿素变性后过柱,看能不能挂,能挂的话肯定tag被折叠到内部去了。
把tag换到蛋白的另一端,或者变性纯化后复性。
或者用其他方法如IEC、HIC纯化吧。
生物资源交流QQ群:1044518333
2楼2011-09-07 12:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
蛋白质纯化的方法很多,有的时候没有必要非得加标签,如果不要标签的话还需要酶切,建议采用其他方法试试,比如例子交换,疏水等都是很常用且有效的方法,相对纯了后再做可能对目标蛋白在什么情况下能够结合更容易判断。希望对你能有作用。
3楼2011-09-07 21:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+4, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-09-08 14:18:40
还有就是如果蛋白质较大的话容易形成空间位阻,不利于二者的结合,如果你是实验室规模,单纯为了得到些样品,可以采用上样时延长上样时间来解决这个问题,延长二者的结合时间,能够增加结合效果。这也是实验室常用的方法
4楼2011-09-07 21:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biology-girl

新虫 (正式写手)

大蛋白 嗯
5楼2014-06-16 10:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 amon7788 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +7 自由煎饼果子 2026-03-16 7/350 2026-03-22 22:40 by ACS Nano——
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见