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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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1989青苹果

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 16S PCR扩增出现问题

我扩的细菌16S的片段,50μl体系,模板量为0.5μl,以前用这些DNA模板能扩出来,现在扩了几次扩不出来了,急!DNA保存在-20℃里的,那位好心大侠解救?
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仰望天空。
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xt123xt

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物冻融用久了 换干的溶了重来
4楼2013-01-11 12:59:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DNA样品也最好不要反复冻融,大分子模板质量会变差很多。你可以试试多加一点模板P。
2楼2013-01-09 08:33:05
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1989青苹果

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-09 08:33:05
DNA样品也最好不要反复冻融,大分子模板质量会变差很多。你可以试试多加一点模板P。

谢啦,今天试了加模板量,还是没扩出来。但是我今天想起来原来退火温度是58℃,后来改为55℃了,这几次没扩出来都是用的55℃的退火温度。
仰望天空。
3楼2013-01-09 23:09:14
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1989青苹果

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xt123xt at 2013-01-11 12:59:33
引物冻融用久了 换干的溶了重来

今晚貌似用mix扩出来啦
仰望天空。
5楼2013-01-13 23:20:39
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