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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增问题
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chenting100

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增问题

扩增一条3kb的条带，在质粒中能扩增出来，但是cDNA中多次都扩不出目的条带，杂带倒是很多，用过takara的EXtaq和LAtaq都不行，请各位大侠帮忙分析一下原因啊，谢谢！
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1楼 2011-07-26 16:48:32
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:17:08
从质粒中扩和从cDNA中扩你不会是用的同一对引物吧？
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2011-07-26 20:08:08
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:17:23
有些可能表达量很低或是扩长片段对cDNA要求高点，所以不容易扩吧！或者你分段扩试下。
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3楼2011-07-26 20:33:35
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hslxiaoyao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
dhd997(金币+1): 最近比较活跃，鼓励一下 2011-07-30 13:17:45
引用回帖:
1楼: Originally posted by chenting100 at 2011-07-26 16:48:32:
扩增一条3kb的条带，在质粒中能扩增出来，但是cDNA中多次都扩不出目的条带，杂带倒是很多，用过takara的EXtaq和LAtaq都不行，请各位大侠帮忙分析一下原因啊，谢谢！

呵呵，这个也说不定呀，引物性质都不同
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4楼2011-07-27 11:11:03
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chenting100

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2011-07-26 20:08:08:
从质粒中扩和从cDNA中扩你不会是用的同一对引物吧？

用的是同一对引物啊
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5楼2011-07-31 14:20:23
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chenting100

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zgb1982 at 2011-07-26 20:33:35:
有些可能表达量很低或是扩长片段对cDNA要求高点，所以不容易扩吧！或者你分段扩试下。

谢谢啊，我分段设计引物扩增试试
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6楼2011-07-31 14:21:15
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