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chenting100

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增问题

扩增一条3kb的条带,在质粒中能扩增出来,但是cDNA中多次都扩不出目的条带,杂带倒是很多,用过takara的EXtaq和LAtaq都不行,请各位大侠帮忙分析一下原因啊,谢谢!
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

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★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:17:08
从质粒中扩和从cDNA中扩你不会是用的同一对引物吧?
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2011-07-26 20:08:08
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:17:23
有些可能表达量很低或是扩长片段对cDNA要求高点,所以不容易扩吧!或者你分段扩试下。
3楼2011-07-26 20:33:35
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hslxiaoyao

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


dhd997(金币+1): 最近比较活跃,鼓励一下 2011-07-30 13:17:45
引用回帖:
1楼: Originally posted by chenting100 at 2011-07-26 16:48:32:
扩增一条3kb的条带,在质粒中能扩增出来,但是cDNA中多次都扩不出目的条带,杂带倒是很多,用过takara的EXtaq和LAtaq都不行,请各位大侠帮忙分析一下原因啊,谢谢!

呵呵,这个也说不定呀,引物性质都不同
4楼2011-07-27 11:11:03
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chenting100

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 空谷幽风 at 2011-07-26 20:08:08:
从质粒中扩和从cDNA中扩你不会是用的同一对引物吧?

用的是同一对引物啊
5楼2011-07-31 14:20:23
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chenting100

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zgb1982 at 2011-07-26 20:33:35:
有些可能表达量很低或是扩长片段对cDNA要求高点,所以不容易扩吧!或者你分段扩试下。

谢谢啊,我分段设计引物扩增试试
6楼2011-07-31 14:21:15
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