24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1106  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

天yi

铜虫 (小有名气)

[求助] 反转录PCR扩增后条带问题

最近在做反转录PCR,事先通过Primer5.0确定了引物位置,扩增出的目的条带应该有1500bp,不知道为什么我做出来的只有500bp左右,求高人指点啊?我是新手,这方面不怎么懂.
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天yi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-10-18 20:54:11
会不会是没考虑内含子?如果是根据基因组DNA设计的引物,而碰巧这1500bp里面有内含子,就可能出现这种情况。因为从RNA反转录来的cDNA是不包括内含子的。

PCR扩增目的条带有2300bp,内含子大约只有800bp,就是去掉内含子之后应该是1500bp
3楼2012-10-19 14:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

会不会是没考虑内含子?如果是根据基因组DNA设计的引物,而碰巧这1500bp里面有内含子,就可能出现这种情况。因为从RNA反转录来的cDNA是不包括内含子的。
2楼2012-10-18 20:54:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoxingliu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
天yi: 金币+1 2012-10-22 21:28:57
设计的引物特异性好吗,否则可能反转录的是整个cDNA的部分序列,建议在检查检查!
4楼2012-10-21 09:21:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天yi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by guoxingliu at 2012-10-21 09:21:31
设计的引物特异性好吗,否则可能反转录的是整个cDNA的部分序列,建议在检查检查!

那是不是去测序一下?
5楼2012-10-22 21:30:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 070300求调剂306分 +3 26要上岸 2026-03-27 3/150 2026-03-27 17:57 by arrow8852
[考研] 复试调剂,一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 10/500 2026-03-26 22:37 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +5 芦lty 2026-03-25 6/300 2026-03-26 20:49 by 不吃魚的貓
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
信息提示
请填处理意见