1楼: Originally posted by 西风的安逸 at 2011-09-30 22:39:32:
反转录不是很容易成功么，可是为什么我最近做的反转录效果都很差呢，RNA跑的带很亮，浓度大概0.5~1ug/ul，这个浓度做反转录应该够了呀，而且RNA提完后马上就反转录了，条件是65度5分钟、42度1小时、85度5分钟，可 ...

6楼: Originally posted by 西风的安逸 at 2011-10-02 09:54:00:
反转录后不是一般都用电泳检测效果么，你为什么对这种做法如此不赞同呢，呵呵。。。。
而且我用cDNA做了PCR扩增，什么条带都没有，所以我推测是不是没有cDNA，是否转录出现了问题

7楼: Originally posted by wqj1988926 at 2011-10-02 11:15:01:
我个人觉得还是扩一下内参，还有就是我个人的经历：就是taq酶失效。

8楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-02 15:11:33:
反转录后一般不用电泳检测：首先cDNA比较珍贵（反转录酶贵），浪费；其次，cDNA是总的cDNA，含量也低，条带是模糊的淡淡的一片，根本提供不了任何信息。
一般是用actin、tublin等内参基因进行扩增来检验cDNA质量。