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xiaotianh

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[求助] western blot时marker问题求助

今天做了一次WB,发现marker没有跑开，应该有九条带，其中红色的是72KD，72KD上面有三条，下面应该有5条带。
但是今天跑出来的条带是红色的明显，但是，72KD以下只有2条，以上也只有隐约可见的2条。
电泳液是新鲜配置的，而且我们实验室不是第一次出现这个情况有，希望能有高手帮忙分析一下是哪里出现了问题吗？

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1楼 2011-07-08 15:05:59

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a83875785

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转膜时间和电压是多少，是什么方式转膜呢？

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2楼2011-07-08 15:48:34

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xiaotianh

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引用回帖:

Originally posted by a83875785 at 2011-07-08 15:48:34:
转膜时间和电压是多少，是什么方式转膜呢？

不是，我不是转膜出了问题，是电泳那一步Marker跑不开。本来应该有九条带的marker，今天做的时候只出来五条带。不知道是为什么？转膜是没问题的。

电泳的条件是70V，恒压，120min，从浓缩胶到分离胶不变电压，一直往下跑。一般来说都是正常的，但是偶尔我们实验室也会出现像今天这样的marker跑不开的情况，不知道为什么？

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3楼2011-07-08 16:34:22

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