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lhj851228

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【答案】应助回帖

xiaotianh(金币+5): 2011-07-10 21:48:40

我用过几种Marker，还没出现lz的问题。我想可能是：1Marker上样量太低，我一般上8ul条带很清晰；2胶可能有问题； 3Marker质量问题

还有就是电泳时到底是换电压好，还是不换电压一直跑下去的好？我只做过换电压跑的。学习交流

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11楼2011-07-10 16:30:55

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xiaotianh

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引用回帖:

Originally posted by lhj851228 at 2011-07-10 16:30:55:
我用过几种Marker，还没出现lz的问题。我想可能是：1Marker上样量太低，我一般上8ul条带很清晰；2胶可能有问题； 3Marker质量问题

还有就是电泳时到底是换电压好，还是不换电压一直跑下去的好？我只做过换电压 ...

恩，我第二天重复做了，结果很好。我觉得应该是我的胶的问题，可能那天做实验的时候没有注意，做胶的时候可能漏加了某种试剂，导致出现这样的结果。但是这种情况在我们实验室确实有过好几次了。谢谢大家热心的帮助啊。

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12楼2011-07-10 21:48:00

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zx1984

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【答案】应助回帖

xiaotianh(金币+5): 2011-07-12 09:39:31

有可能是过硫酸铵的问题，影响了丙烯酰胺和双丙烯酰胺的交联，换一个新的过硫酸铵试试。还有现用15%的胶试试，你说的marker好像是10条带才对。

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13楼2011-07-11 19:26:40

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xiaotianh

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引用回帖:

Originally posted by zx1984 at 2011-07-11 19:26:40:
有可能是过硫酸铵的问题，影响了丙烯酰胺和双丙烯酰胺的交联，换一个新的过硫酸铵试试。还有现用15%的胶试试，你说的marker好像是10条带才对。

谢谢，你的回答很有价值，那天的AP确实是用了一个多星期了，第二天我做的时候是重新配制的AP呢，谢谢你，真的很有用！

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14楼2011-07-12 09:40:27

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子曰包子好吃

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你用的是fermenta的marker吧我也在用 5ul就很清楚了
准确的说是一共10条带红色的是72 以上分别是90 130 170 以下是55 43 37 26 17
10（草绿色）其中170的比较淡至于有多少条带显出来跟你的胶的浓度有关我这里转膜时间一般是100v 60min 很好的
你的marker是怎么保存的应该在-20℃保存每次用完后立刻放回还有就是如果你的marker结冰的话建议分装以下避免反复冻融

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15楼2011-07-16 09:38:34

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