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western blot时marker问题求助
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xiaotianh
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在线: 97.3小时
虫号: 36884
注册: 2004-02-12
专业: 病原真菌学
[
求助
]
western blot时marker问题求助
今天做了一次WB,发现marker没有跑开,应该有九条带,其中红色的是72KD,72KD上面有三条,下面应该有5条带。
但是今天跑出来的条带是红色的明显,但是,72KD以下只有2条,以上也只有隐约可见的2条。
电泳液是新鲜配置的,而且我们实验室不是第一次出现这个情况有,希望能有高手帮忙分析一下是哪里出现了问题吗?
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1楼
2011-07-08 15:05:59
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虫号: 1347211
注册: 2011-07-16
性别: GG
专业: 细胞信号转导
你用的是fermenta的marker吧 我也在用 5ul就很清楚了
准确的说是一共10条带 红色的是72 以上分别是90 130 170 以下是55 43 37 26 17
10(草绿色)其中170的比较淡 至于有多少条带显出来 跟你的胶的浓度有关 我这里转膜时间一般是100v 60min 很好的
你的marker是怎么保存的 应该在-20℃保存 每次用完后立刻放回 还有就是如果你的marker结冰的话 建议分装以下 避免反复冻融
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15楼
2011-07-16 09:38:34
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